NY_T 3322-2018 饲料中柠檬黄等7种水溶性色素的测定 高效液相色谱法
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ID： |
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0.9 |
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8 |
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日期： |
2024-8-13 |
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ICS 65.120,B46 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 3322—2018,饲料中柠檬黄等7种水溶性色素的测定,高效液相色谱法,Determination of tartrazine 7 kinds of water-soluble pigment in feeds一,High performance liquid chromatography,2018-12-19 发布 2019-06-01 实施,ハ，中华人民共和国农业农村部发布,ヽ,NY/T 3322—2018,刖 百,本标准按照GB/T 1. 1-2009给出的规则起草,本标准由农业农村部畜牧兽医局提出〇,本标准由全国饲料エ业标准化技术委员会(SAC/TC 76)归口,本标准起草单位:河南省兽药饲料监察所,本标准主要起草人:吴宁鹏、孟蕾、宋志超、陈小鸽、宋善道、舒畅、刘素梅、巩丹、邱天宝、周小娟、于,辉、陈少渠,NY/T 3322—2018,饲料中柠檬黄等7种水溶性色素的测定 高效液相色谱法,范围,本标准规定了饲料中柠檬黄、范菜红、胭脂纟-I,相色谱测定方法,本标准适用于食品动物配合繼国和浓缩颯雜宠物,毫蓝」!落黄、诱惑红7种水溶性色素含量的液,丒观赏鱼饲料蜥檬黄、范菜红、胭脂红、靛,蓝、亮蓝、日落黄、诱惑红7呀^^定p (J B/Z &,本标准亮蓝的检帯”/ ＜：，. 25索7騒験^^^^^14岛嶼^^^^脂红、日落黄、诱惑,红的检出限为0. 5 mg ! J:限为^^/kg;靛蓝的检岀限纠J做渦^^/ 2. 0 mg/kgo,2规范性引用文件^^^,的，川I」文件,仅版本适用于本文,蠶包括所有的修改单)适用于本文專、5 .,GB/T,GB/T,GB/T,6682 分.,146^V,20195 勾,采样,3原理,4试剂或材料,除非另有说明讲メ,柠檬黄、范菜红刃,甲醇:色谱纯,卜低于95.0%,乙贋:色谱纯,甲酸:含量不低于88加,乙酸镂溶液(0. 02 mol/L,pH为皺。):称释至500 mL,混匀,用乙,酸调节pH至5. 0,提取液:取乙“青250 mL、丙二醇50 mL^ mL,混匀,用水,4.7 2%甲酸溶液:取甲酸2 mL,用水稀释至100 mL,4.8 1%甲酸溶液:取甲酸1mL,用水稀释至100 mL,4. 9甲酸甲醇溶液:取甲醇80 mL,用1%甲酸溶液(4. 8)稀释至100 mLo,4. 10 10%氨化甲醇溶液:取氨水10 mL,用甲醇稀释至100 mL,4. 11标准储备液(Img/mL):分别精密称取柠檬黄、范菜红、胭脂红、靛蓝、亮蓝、日落黄、诱惑红(4. 1),对照品约!0 mg(准确至0. 01 mg),置10 mL棕色容量瓶中,用水稀释并定容,分别配制成1 mg/mL的,标准储备液。0℃.4℃避光保存,有效期为6个月;靛蓝标准储备液于0℃.4℃避光保存,有效期为1,个月,4. 12混合标准中间液(100 Ag/mL):分别准确移取标准储备液(4.11)各1mL,置10 mL容量瓶中,用,1,NY/T 3322—2018,水稀释至刻度,混匀。配制成100 >g/mL的混合标准中间液。0℃.4℃下避光保存,有效期为1周,4. 13弱阴离子交换固相萃取柱(WAX):含亲水基团的聚苯乙烯/二乙烯基苯共聚物上键合哌嗪基团,500 mg/6 mL,或性能相当的萃取柱,4. 14微孔滤膜(0.45 A m):尼龙滤膜或性能相当者,5仪器设备,5. I高效液相色谱仪:配二极管阵列检测器或者可变多波长紫外可见检测器,5. 2分析天平:感量0. 01 mg,5.3天平:感量。.001g,5. 4离心机:转速不低于10 000 r/min,5. 5振荡器,5.6 涡旋振荡器,5.7 超声波清洗器,5.8 固相萃取装置,5.9 氮吹仪,5. 10酸度计,6样品,按GB/T 14699. 1抽取有代表性的饲料样品,用四分法缩减取样。按照GB/T 20195制备样品,粉,碎后过0. 45 mm孔径的分析筛,混匀,装入磨口瓶中,备用,7试验步骤,7. 1提取,称取试样约2 g(精确至0. 001 g)于50 mL离心管ヰI,准确加入提取液(4. 6)20 mL,涡旋混合后,振,荡10 min,水浴超声提取10 min。10 000 r/min离心10 min,移取上清液至另一离心管中。残渣准确加,人提取液20 mL重复提取,合并上清液。准确移取上清液10 mL于另ー离心管中,加入水20 mL,用甲,酸调至pH(2.0±0.2),混匀后,10 000 r/min离心10 min,取上清液,备用,7.2 净化,弱阴离子交换固相萃取柱(4. 13)依次用甲醇、水和2%甲酸溶液(4. 7)各5 mL活化,将备用液,(7.1)全部过柱。依次用2%甲酸溶液、甲酸甲醇溶液(4. 9)和甲醇各5 mL淋洗,抽干。再用10%氨化,甲醇溶液(4. 10)5 mL洗脱,将洗脱液置40℃下氮气吹干。准确加入水0. 5 mL溶解残余物,涡旋混匀,过0. 45 (j.m微孔滤膜,供HPLC测定,7.3 标准曲线的制备,准确移取柠檬黄、优菜红、胭脂红、靛蓝、亮蓝、日落黄、诱惑红混合标准中间液(4. 12)适量,用水稀,释,制得浓度为 0. 25 >g/mL、〇. 5 闻 mL、l. 0 闻 mL、2. 0 闻 mL、10. 0 闻 mL、2〇. 0 闻mL 和 50. 0,Mg/mL的标准系列溶液,由低浓度到高浓度进高效液相色谱仪测定。以色谱峰面积为纵坐标、浓度为,横坐标,绘制标准曲线。柠檬黄、免菜红、胭脂红、靛蓝、亮蓝、……
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